Recibido: 10/01/2026 Aprobado:15/02/2026
Vol 6 N|1
564 | P รก g i n a

DOI:
https://doi.org/10.70208/3007.8245.v6.n1.351
V
ariaciรณn de los efectos de la melatonina sobre la motilidad y
funcionalidad del semen ovino refrigerad
o
Karen Paola Asanza Dominguez

karen.asanza.05@est.ucacue.edu.ec

https://orcid.org/0009-0006-0304-0640

Universidad
Catรณlica de Cuenca
Andres Leonardo Moscoso Piedra

amoscosop@ucacue.edu.ec

https://orcid.org/0000-0002-
4017-0165
Universidad
Catรณlica de Cuenca
Manuel Maldonado Cornejo

mmaldonadoc@ucacue.edu.ec

https://orcid.org/0000-0002-
1507-2280
Universidad
Catรณlica de Cuenca
Juan Carlos Alvarado Alvarado

jalvaradoa@ucacue.edu.ec

https://orcid.org/0000-0002-
7240-179X
Universidad
Catรณlica de Cuenca
RESUMEN

La melatonina es un potente antioxidante indolamรญnico que protege la integridad de las membranas
celulares frente al estrรฉs oxidativo y estabiliza la funcionalidad mitocondrial. Determinar la dosis
funcional de melatonina sobre el semen ovino refrigerado a partir de la variaciรณn de su efecto sobre la
motilidad y funcionalidad espermรกtica fue el objetivo de este estudio, evaluando diversas
concentraciones sobre semen de carneros Katahdin y Blackbelly a 5 ยฐC. Se utilizรณ una escala
logarรญtmica desde 1/16 mM hasta 16 mM, con 8 repeticiones durante 2, 4 y 24 horas. Los resultados
demostraron que la melatonina actรบa de forma dosis-dependiente bajo un modelo polinรณmico de
segundo grado en funciรณn de logโ‚‚ alcanzando su mรกxima eficacia biolรณgica a las 4 horas. En este
periodo, se registraron valores รณptimos de vitalidad (80%) con 1,46 mM, progresividad (40,20%) con
dosis cercanas a 16 mM y linealidad (38,06%) con 0,5 mM. El comportamiento parabรณlico de la
linealidad advierte un efecto bifรกsico, donde concentraciones excesivas resultan contraproducentes
para la cinemรกtica celular. Se concluye que una concentraciรณn de 1,5 mM representa el equilibrio
รณptimo para preservar la estructura y el desplazamiento del espermatozoide ovino en estas razas,
siendo la dosis sugerida para su posterior crioconservaciรณn.

Palabras clave:
Melatonina., criopreservaciรณn., linealidad., vitalidad., progresividad
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Variation of the effects of melatonin on the motility and
functionality of chilled ovine semen

ABSTRACT

Melatonin is a potent indolaminic antioxidant that protects cell membrane integrity against oxidative

stress and stabilizes mitochondrial functionality. To determine the functional dose of melatonin on

chilled ram semen based on the variation of its effect
on motility and sperm functionality was the
objective of this study, evaluating various concentrations on Katahdin and Blackbelly ram semen at 5 ยฐC.

A logarithmic scale from 1/16 mM to 16 mM was used, with 8 replicates during 2, 4, and 24 hours.

Results d
emonstrated that melatonin acts in a dose-dependent manner under a second-grade
polynomial model as a function of
logโ‚‚, reaching its maximum biological efficacy at 4 hours. During
this period, optimal values were recorded for vitality (80%) with 1.46 mM, progressivity (40.20%) with

doses near 16 mM, and linearity (38.06%) with 0.5 mM. The parabolic behavior of linearity wa
rns of a
biphasic effect, where excessive concentrations are counterproductive for cellular kinematics. It is

concluded that a concentration of 1.5 mM represents the optimal balance to preserve the structure and

displacement capacity of the ovine sperm in
these breeds, being the suggested dose for subsequent
cryopreservation.

Keywords
: Melatonin, cryopreservation, linearity, vitality, progressiveness
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I
NTRODUCCIร“N
Los espermatozoides de mamรญferos presentan una vulnerabilidad inherente al estrรฉs oxidativo,
fenรณmeno caracterizado por un desequilibrio entre prooxidantes y antioxidantes que resulta en un
incremento de especies reactivas de oxรญgeno (ROS) del tracto genital masculino. Esta alteraciรณn
compromete a la integridad espermรกtica, manifestรกndose a travรฉs de la peroxidaciรณn de proteรญnas de
lรญpidos de membrana, la oxidaciรณn de proteรญnas y el daรฑo al รกcido desoxirribonucleico (Casao et al.,
2009).

Por ello que se han realizado diversas investigaciones para contrarrestar este problema. Un
estudio
realizado por Widyastuti et al. (2024) tuvo como objetivo determinar el efecto de la suplementaciรณn
con melatonina en los parรกmetros de calidad del esperma de ciervos y los niveles de expresiรณn de
genes antioxidantes en diluyentes de semen durante el almacenamiento en frรญo. Se evaluaron diferentes
concentraciones: control, 0,1; 0,2 y 0,3mM. Posteriormente, el semen tratado se almacenรณ a 5 ยฐC
durante 72 h. Los resultados mostraron que la concentraciรณn de 0,2 mM permitiรณ mantener los
parรกmetros cinรฉticos.

Asimismo, un estudio realizado por
Hernรกndez (2024) desarrollรณ un anรกlisis del efecto de diferentes
concentraciones de melatonina (0; 1.5 y 3.5 mM) en semen de caprinos de raza
Saneen crรญo preservado.
Los resultados evidenciaron que, tras la congelaciรณn y descongelaciรณn no hubo diferencias
significativas en motilidad progresiva, funcionalidad de membrana e integridad del acrosoma; sin
embargo, el movimiento de onda fue mayor en los tratamientos con melatonina en comparaciรณn al
control.

Por otro lado,
Flores y sus colaboradores (2017) evaluaron el efecto antioxidante de la melatonina en
la conservaciรณn de semen porcino a 16 ยฐC. Utilizaron semen de verracos de 7 a 18 meses, comparando
un grupo control y otro tratado con melatonina (1,25 mM). Los resultados evidenciaron una reducciรณn
del malondialdehรญdo y un aumento de la actividad del superรณxido dismutasa, lo que indicรณ un efecto
antioxidante beneficioso durante la conservaciรณn seminal.

La melatonina es una hormona clave en la regulaciรณn de la estacionalidad reproductiva en carneros, y
ha sido detectada tanto en los testรญculos como en el plasma seminal, con receptores especรญficos en los
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espermatozoides
๏ผˆJimรฉnez et al. 2018๏ผ‰ใ€‚ Esta evidencia sugiere que podrรญa ejercer un rol directo
en procesos como la capacitaciรณn espermรกtica y la protecciรณn contra la apoptosis celular. La viabilidad
del semen durante la refrigeraciรณn representa un verdadero desafรญo en la inseminaciรณn artificial. A
diferencia de otras especies, la refrigeraciรณn de dosis seminales para la inseminaciรณn artificial en ovinos
no ha alcanzado un desarrollo comparable, principalmente debido a las bajas tasas de fertilidad, que
rondan el 50%(Tiwari et al., 2022
๏ผ‰ใ€‚ Por lo tanto, el uso de melatonina podrรญa constituir una
alternativa eficaz para mejorar la calidad y longevidad espermรกtica. Por ello, resulta pertinente estudiar
su efecto en el semen refrigerado de carneros como una posible estrategia para optimizar las
biotecnologรญas reproductivas en ovinos (Jimรฉnez et al., 2018
๏ผ‰ใ€‚
Para el presente estudio se planteรณ determinar la dosis funcional de melatonina sobre el semen ovino
refrigerado a partir de la variaciรณn de su efecto sobre la motilidad y funcionalidad espermรกtica; en este
contexto, se evaluรณ la funcionalidad y motilidad espermรกtica del semen ovino refrigerado con
diferentes concentraciones, con el fin de determinar la dosis รณptima en funciรณn de la viabilidad,
progresividad y linealidad espermรกtica.

La criopreservaciรณn de semen es una herramienta รบtil para preservar la fertilidad y se emplea
comรบnmente antes de su uso en tรฉcnicas de reproducciรณn asistida, como la fertilizaciรณn in vitro y la
inyecciรณn intracitoplasmรกtica de espermatozoides
(Naella et al., 2004). La calidad del semen
almacenado
tras la descongelaciรณn puede disminuir por daรฑo celular, estrรฉs oxidativo y alteraciรณn de
membranas. O
tra causa asociada es la criolesiรณn mitocondrial, considerada una de las principales
responsables de la baja calidad espermรกtica tanto del semen congelado como descongelado, debido a
la funciรณn esencial de las mitocondrias en el suministro de energรญa y su baja tolerancia a la
descongelaciรณn (
Zhang et al., 2024).
Para reducir estos efectos se han probado nuevos
antioxidantes, entre ellos la melatonina (N-acetil-5-
metoxiriptamina), hormona con potente acciรณn antioxidante capaz de neutralizar radicales libres y
favorecer la actividad de enzimas que mantienen el equilibrio redox y la integridad de las membranas
celulares
(Yadav et al., 2023). Ademรกs, se ha demostrado eficacia en la protecciรณn celular frente al
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estrรฉs oxidativo (Flores et al., 2018),
En el รกmbito reproductivo, se utiliza como aditivo en extensores
de semen debido a su capacidad para proteger a los espermatozoides del daรฑo oxidativo durante la
congelaciรณn y
descongelaciรณn, mejorando parรกmetros como la motilidad, la viabilidad y el potencial
mitocondrial
(Yadav et al., 2023).
Este antioxidante participa en la fertilidad del carnero
actuando desde la espermatogรฉnesis hasta la
eyaculaciรณn. Mejora la calidad seminal al aumentar el flujo sanguรญneo mediante la disminuciรณn de la
resistencia vascular, lo que favorece la concentraciรณn y motilidad espermรกtica, asรญ como la
espermatogรฉnesis (Shahat,
Thundathil & Kastelic, 2022). Ademรกs, actรบa sobre cรฉlulas germinales y de
Leydig a travรฉs de sus receptores MT1, MT2 y ROR
ฮฑ, desempeรฑando un papel fundamental en la
salud reproductiva masculina. Tambiรฉn contribuye a la diferenciaciรณn celular y a la producciรณn de
testosterona, ofrec
iendo protecciรณn antioxidante. La sรญntesis local en el testรญculo y el epidรญdimo es clave
para la maduraciรณn espermรกtica, la funciรณn epitelial y la secreciรณn epididimaria. En el plasma seminal
resulta vital para mantener el equilibrio redox, proteger a los espermatozoides del daรฑo y modular su
capacitaciรณn mediante el control de especies reactivas de oxรญgeno y รณxido nรญtrico (Casao, Peรฑa &
Pรฉrez, 2025).

Los principales parรกmetros como vitalidad, motilidad y funcionalidad son esenciales en la evaluaciรณn
del material seminal, ya que indican si los espermatozoides estรกn vivos y si pueden desplazarse de
forma efectiva. La vitalidad refleja la integridad de la membrana celular, mientras que la motilidad es
indispensable para que los espermatozoides avancen por el tracto reproductivo y alcancen el ovocito.
Ambos parรกmetros estรกn directamente relacionados con el potencial de fertilizaciรณn
. (Sunder & Leslie,
2025)
.
El empleo de semen refrigerado es una estrategia habitual en los programas de reproducciรณn ovina, ya
que permite conservar su viabilidad durante periodos cortos y facilita su traslado a diferentes unidades
de producciรณn. En carneros, mantener las dosis seminales aproximadamente
a 15 ยฐC permite
conservar su funcionalidad por varias horas, lo que resulta beneficioso para su aplicaciรณn en campo,
especialmente cuando es necesario transportarlo a zonas alejadas (Tisalema et al., 2024
๏ผ‰ใ€‚ No
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obstante, el proceso de enfriamiento debe realizarse cuidadosamente, ya que los espermatozoides
ovinos son especialmente sensibles a los cambios bruscos de temperatura (Durรก, 2023).

Esta susceptibilidad se debe a la composiciรณn particular de su membrana celular, caracterizada por un
bajo contenido de colesterol, lo que disminuye su resistencia ante variaciones tรฉrmicas. Cuando la
temperatura desciende de forma abrupta, pueden producirse alteraciones como pรฉrdida de motilidad,
daรฑo estructurales de la membrana, incremento del estrรฉs oxidativo e incluso procesos celulares no
deseados, como la capacitaciรณn prematura o la apoptosis (Jimรฉnez et al., 2018
๏ผ‰ใ€‚
Con base a este marco,se propuso definir la dosis รณptima de melatonina en semen fresco ovino como
fundamento para su aplicaciรณn en biotecnologรญas reproductivas ovinas, bajo la hipรณtesis de que esta
molรฉcula tiene un comportamiento dosis-dependiente y no lineal.

MATERIALES Y Mร‰TODOS

La investigaciรณn se desarrollรณ en el Laboratorio de Reproducciรณn Animal de la Unidad Acadรฉmica de
Ciencias Agropecuaria
s de la Universidad Catรณlica de Cuenca, ubicada en la ciudad de Cuenca,
provincia del Azuay, Ecuador.

En do
nde se emplearon diez tratamientos correspondientes a distintas concentraciones de melatonina
(1/16 mM, 1/8 mM, 1/4 mM, 1/2 mM, 1 mM, 2 mM, 4 mM, 8 mM y 16 mM), ademรกs de un grupo
control sin antioxidante. El tamaรฑo muestral efectivo estuvo constituido por seis eyaculados (n = 6),
tres obtenidas de un carnero de raza Katahdin y tres de un carnero de raza Black Belly, ambos adultos,
clรญnicamente sanos de fertilidad probada y mantenidos bajo condiciones homogรฉneas de manejo. La
muestras seminales de estos animales fueron similares con una concentraciรณn de 4,5x 10โถ de
espermatozoides con una motilidad masal de 90% controlando asi la variabilidad de las muestras de
los sementales. Cada unidad seminal fue fraccionada en alรญcuotas, tratadas con las diferentes
concentraciones y posteriormente refrigeradas a 5 ยฐC para su anรกlisis a las 2,
4 y 24 horas posteriores
al tratamiento.
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Fase de campo

Para la colecciรณn de semen se usรณ una vagina artificial que contenรญa agua entre 42ยฐC y
44ยฐC con una
cantidad de 50 ml.
Se agregรณ aire en el interior de la camisa de lรกtex hasta llegar a un centรญmetro de
grosor, lo que facilitรณ la colecta. En el extremo del
cuello de la vagina artificial se colocรณ un tubo
colector estรฉril falcรณn de 15ml. El
operario se coloca a lado derecho de la oveja y sostiene la vagina
artificial en un รกngulo
de 40ยฐC, el macho realiza el efecto flehmen y hace el golpe de riรฑรณn siendo un
indicativo de la eyaculaciรณn, la muestra seminal se sostiene con la mano a temperatura
corporal de
37ยฐC evitando asรญ el contacto con la luz ultravioleta y cambios de
temperatura hasta llegar al
laboratorio
de acuerdo con las recomendaciones de (Lema et al., 2025).
Fase de laboratorio

Se evaluaron las caracterรญsticas macroscรณpicas del semen fresco, registrรกndose un volumen promedio
de 1,2 ยฑ0,2ml por colecta, con apariencia blanco lechosa, olor neutro y ausencia de impurezas. En la
evaluaciรณn microscรณpica se obtuvo una motilidad masal superior al 80% y una concentraciรณn
espermรกtica comprendida entre 4000 ร— 10โถ y 4500 ร— 10โถ espermatozoides/ml, valores determinados
mediante un fotรณmetro SMD (Minitube) para ovinos. Para la prediluciรณn se utilizรณ el diluyente Triladylยฎ
(Minitube), cuya formulaciรณn incluye yema de huevo, compuesta por lipoproteรญnas y fosfolรญpidos que
contribuyen a la protecciรณn de la membrana plasmรกtica espermรกtica, como lo indican Farfรกn, Moscoso

&
Alvarado ๏ผˆ2025๏ผ‰. Se colocรณ 100 ฮผL alรญcuota de cada tratamiento con 900 ฮผL de soluciรณn madre
posteriormente se refrigรฉro a 5
ยฐC para su evaluaciรณn posterior (Paucar et al. 2025).
Anรกlisis instrumental

Valdez, Moscoso & Maldonado (2024) sugieren el
sistema CASA (Computer-Assisted Sperm Analysis)
utilizando un portaobjetos con 5
ฮผL y un cubreobjetos para el registro digital y anรกlisis de los
parรกmetros cinemรกticos espermรกticos
, cada muestra se mantuvo a 37 ยฐC durante la lectura. La
viabilidad se determinรณ mediante la prueba de Eosinaโ€“Nigrosina, mezclando 3 ฮผL de semen con igual
volumen de colorante
en donde los espermatozoides vivos permanecieron incoloros, mientras que los
muertos se tiรฑeron de rosa. Se contaron
100 cรฉlulas por muestra.
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Anรกlisis estadรญstico

Los datos obtenidos se procesaron en el software InfoStat 2020ยฎ, aplicando un ANOVA multifactorial
(p < 0,05) para determinar el efecto de las concentraciones de melatonina y el tiempo de
almacenamiento sobre los parรกmetros seminales. Las diferencias significativas se analizaron mediante
la prueba de Tukey (p < 0,05) y finalmente, se elaborรณ una curva de regresiรณn polinรณmica cuadrรกtica
en funciรณn de Log2 para estimar la dosis รณptima de melatonina, obteniรฉndose los puntos mรกximos de
motilidad progresiva, linealidad y viabilidad espermรกtica.

RESULTADOS Y DISCUSIร“N

Una vez verificada la homogeneidad de las muestras de los tres ovinos donadores, se realizรณ el anรกlisis
de varianza (ANOVA) para determinar las diferencias entre l
as diversas dosis de Melatonina sobre las
variables de permeabilidad, progresividad y cinรฉtica espermรกtica, evaluadas en semen fresco diluido
y
refrigerado
. Los resultados obtenidos se describen a continuaciรณn:
Figura 1: Curva del efecto de la melatonina sobre la Vitalidad a las 2, 4 y 24 horas de refrigeraciรณn a
5ยฐC

La
figura 1 muestra el efecto de las diferentes dosis (mM) sobre el porcentaje de espermatozoides vivos
evaluado a las 2, 4 y 24 horas. Los datos se ajustaron a modelos polinรณmicos de segundo grado,

y = -0,0073x2 + 0,0593x + 0,679
Rยฒ = 0,2608
2 HORAS
y = -0,0044x2 + 0,0481x + 0,6637
Rยฒ = 0,3542
4 HORAS
y = -0,0063x2 + 0,0503x + 0,6137
Rยฒ = 0,2241
24 HORAS
0,000
0,100
0,200
0,300
0,400
0,500
0,600
0,700
0,800
0,900
1,000
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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evidenciando un comportamiento dosis
dependiente. El mayor valor de viabilidad se registrรณ a las 4
horas (Y = 0,80), alcanzado con una dosis
interpolada cercana a 1,46 mM. En las evaluaciones a las 2
y 24 horas, los valores mรกximos se obtuvieron con dosis inferiores a 0,6
mM, manteniรฉndose
porcentajes de viabilidad superiores al 70%. A concentraciones mayores se observรณ una disminuciรณn
progresiva del porcentaje de espermatozoides vivos.

Figura 2: Curva del efecto de la melatonina sobre la progresividad a las 2, 4 y 24 horas de refrigeraciรณn a
5ยฐC

La Grรกfica 2 presenta el comportamiento de la progresividad espermรกtica en funciรณn de las dosis
evaluadas a las 2, 4 y 24 horas. Se observรณ un ajuste polinรณmico de segundo grado en los tres tiempos
de evaluaciรณn. El mayor valor de progresividad se registrรณ a las 4 horas, alcanzando un mรกximo de
40,20% con una dosis
estimada cercana a 16 mM. En contraste, a las 2 y 24 horas los valores mรกximos
de progresividad fueron inferiores y se alcanzaron con dosis menores a 1
mM, evidenciรกndose una
reducciรณn progresiva de esta variable a concentraciones superiores.

y = -0,1983x2 + 0,6269x + 35,395
Rยฒ = 0,3972
2 HORAS
y = -0,0912x2 + 2,0961x + 28,16
Rยฒ = 0,2631
4 HORAS
y = -0,416x2 + 3,4754x + 21,623
Rยฒ = 0,3039
24 HORAS
0
10
20
30
40
50
60
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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Figura 3: Curva del efecto de la melatonina sobre la linealidad a las 2, 4 y 24 horas de refrigeraciรณn a 5ยฐC

La Grรกfica 3 muestra la respuesta del porcentaje de linealidad del movimiento espermรกtico (%LIN)
frente a las distintas dosis evaluadas a las 2, 4 y 24 horas. En los tres tiempos se observรณ un
comportamiento parabรณlico, con un mรกximo claramente definido. El mayor valor de %LIN se registrรณ
a las 4 horas (Y = 38,06%), alcanzado con una dosis
interpolada cercana a 0,5 mM. A partir de esta
concentraciรณn, el porcentaje de linealidad disminuyรณ progresivamente tanto a las 2 como a las 24 horas.

Tabla 1: Resumen de valores รณptimos en la curva de Melanina

Ecuaciรณn
X
mรกximo
Y mรกximo mmoles
(interpolado)

Vivos

2 Horas
4,06 0,80 0,53
4 Horas
5,46 0,80 1,46
6 Horas
3,99 0,71 0,49
Progresivos

2 Horas
1,58 35,89 0,10
4 Horas
11,49 40,20 >16
6 Horas
4,17 28,88 0,58
%LIN

2 Horas
4,20 35,75 0,55
4 Horas
5,53 38,06 1,50
6 Horas
3,08 34,36 0,27
y = -0,2693x2 + 2,2186x + 31,187
Rยฒ = 0,255
2 HORAS
y = -0,2374x2 + 2,6265x + 30,8
Rยฒ = 0,2119
4 HORAS
y = -0,1238x2 + 0,7632x + 33,19
Rยฒ = 0,1371
24 HORAS
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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En resumen, la
vitalidad espermรกtica, el mejor tratamiento en donde se obtuvo a las 4 horas con una
dosis aproximada de 1,5
mM, alcanzando un 80% de espermatozoides vivos. Respecto a la
progresividad espermรกtica, el mayor valor se registrรณ a las 4 horas con una dosis cercana a 16
mM,
logrando una progresividad de 40,20%. Finalmente, en la cinemรกtica espermรกtica, expresada como
porcentaje de linealidad, el mejor tratamiento se observรณ a las 4 horas con una dosis aproximada de
0,5 mmol, alcanzando un valor de 38,06%
(Tabla 1)
DISCUSIร“N

La motilidad progresiva mรกxima registrada en el presente estudio se situรณ entre 35 % y 40 %, mientras
que la vitalidad alcanzรณ valores cercanos al 80 % y la linealidad del movimiento espermรกtico (LIN %)
llegรณ aproximadamente al 38 % durante las primeras cuatro horas de refrigeraciรณn. Estos valores sirven
como referencia para interpretar el efecto de la melatonina, ya que en ausencia de esta molรฉcula o
cuando se emplean concentraciones elevadas, los parรกmetros seminales tienden a disminuir. En dichas
condiciones, la motilidad progresiva puede reducirse a 20โ€“25 %, la vitalidad a 60 % y la linealidad
alrededor de 30 %.

Resultados similares han sido descritos en investigaciones previas Ji et al. (2024) y Manchevet al.,

(2014)
evaluaron el uso de antioxidantes en semen ovino refrigerado en carneros Hu y de razas
mediterrรกneas
con marcada estacionalidad reproductiva. Estos autores reportaron que, aunque los
antioxidantes puedan disminuir el daรฑo oxidativo y contribuir a preservar la calidad espermรกtica, las
mejoras en los parรกmetros de motilidad suelen ser moderadas durante el almacenamiento enfrรญo. Este
comportamiento coincide con lo observado en el presente estudio, donde la progresividad espermรกtica
puede verse limitada por factores como el estrรฉs tรฉrmico y la elevada sensibilidad de la membrana
plasmรกtica de los espermatozoides ovinos.

En relaciรณn con el efecto especรญfico de la melatonina, la vitalidad espermรกtica obtenida en esta
investigaciรณn muestra concordancia con lo reportado por Dai et al. (2019). Estos autores indicaron que
la adiciรณn de melatonina en concentraciones entre 0,05 mM y 0,2 mM durante el almacenamiento a
4 ยฐC no genera diferencias estadรญsticas significativas en algunos parรกmetros seminales; sin embargo,
contribuye a mantener un mayor porcentaje de espermatozoides viables en comparaciรณn con el grupo
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control. Asimismo, algunos estudios sugieren que concentraciones cercanas a 1,5 mM pueden
asociarse con mejores valores de vitalidad y progresividad espermรกtica. Este efecto se relaciona con
la capacidad antioxidante de la melatonina, la cual protege la membrana plasmรกtica frente al daรฑo
oxidativo inducido por la refrigeraciรณn.

De acuerdo con lo descrito por Dai et al. (2019), Manchev et al. (2014) y Ji et al. (2024), la melatonina
parece actuar principalmente preservando la integridad estructural de los espermatozoides frente al
estrรฉs oxidativo, mientras que los parรกmetros cinemรกticos pueden verse mรกs influenciados por la
concentraciรณn utilizada y el tiempo de almacenamiento.

En cuanto a la linealidad del movimiento espermรกtico (LIN %), en el presente estudio se observรณ una
tendencia de tipo parabรณlico en funciรณn de las concentraciones de melatonina evaluadas a las 2, 4 y 24
horas de refrigeraciรณn. Para este parรกmetro se estimรณ un valor รณptimo cercano a 0,5 mM, lo que sugiere
que existe una concentraciรณn especรญfica capaz de favorecer la trayectoria rectilรญnea del espermatozoide
durante las primeras etapas del almacenamiento en frรญo. Este comportamiento resulta relevante, ya que
el parรกmetro LIN mostrรณ valores relativamente similares a lo largo de los diferentes tiempos de
evaluaciรณn.

Durante el proceso de almacenamiento, es comรบn que los espermatozoides pierdan gradualmente la
capacidad de desplazarse en lรญnea recta, lo que se refleja en la disminuciรณn de parรกmetros como LIN
y VSL. Sin embargo, la motilidad global puede mantenerse debido a la conservaciรณn de la velocidad
curvilรญnea y del movimiento total de la poblaciรณn espermรกtica. Este comportamiento ha sido descrito
mediante sistemas de anรกlisis CASA en diferentes especies domรฉsticas, incluyendo bovinos y ovinos
(ลžavkay, Yalรงฤฑn & TavลŸanoฤŸlu, 2020).

Por otra parte, la disminuciรณn del %LIN observada en concentraciones superiores a 0,5 mM sugiere
que niveles elevados de melatonina no necesariamente generan beneficios adicionales sobre la calidad
del movimiento espermรกtico. Este fenรณmeno ha sido descrito en diversos modelos experimentales,
donde concentraciones altas de antioxidantes pueden alterar el equilibrio redox fisiolรณgico o interferir
con procesos metabรณlicos relacionados con la motilidad celular. En este sentido, la reducciรณn de la
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linealidad observada a dosis elevadas podrรญa estar asociada con un posible efecto bifรกsico de la
melatonina (Makris et al. 2023).

A pesar de ello, concentraciones moderadas de melatonina han demostrado ejercer efectos protectores
en diferentes modelos experimentales. Widyastuti et al. (2024) reportaron que la adiciรณn de 0,2 mM de
melatonina en semen de machos cabrรญos permitiรณ mantener los parรกmetros de calidad espermรกtica
hasta por 72 horas de almacenamiento, lo cual se atribuyรณ a su capacidad para disminuir el estrรฉs
oxidativo y preservar la integridad celular.

En conjunto, estos hallazgos indican que la melatonina actรบa como un antioxidante eficaz durante la
conservaciรณn del semen, aunque su efecto depende de la concentraciรณn utilizada. Dosis moderadas
contribuyen a reducir la producciรณn de especies reactivas de oxรญgeno (ROS), preservar la integridad de
las membranas celulares y favorecer parรกmetros asociados con una motilidad espermรกtica mรกs
eficiente. En este contexto, el incremento del %LIN observado a las 4 horas podrรญa reflejar un proceso
de estabilizaciรณn celular posterior al choque tรฉrmico inicial provocada por la refrigeraciรณn, en el cual la
melatonina contribuirรญa a mantener el equilibrio redox intracelular (Deng et al., 2017).

CONCLUSIONES

L
a suplementaciรณn con melatonina mejora la calidad del semen ovino refrigerado a 5 ยฐC de manera
dosis-dependiente, alcanzando su mรกxima eficacia biolรณgica a las 4 horas de almacenamiento. El uso
de dosis moderadas, especรญficamente entre 0,5 y 1,5 mM, optimiza la vitalidad y la linealidad
espermรกtica al proteger la integridad de la membrana frente al estrรฉs oxidativo; sin embargo, el
comportamiento parabรณlico de los resultados advierte que concentraciones excesivas resultan
contraproducentes para la cinemรกtica celular, estableciendo la dosis de 1,5 mM como el punto de
equilibrio รณptimo para preservar la funcionalidad y estructura del espermatozoide ovino durante la
refrigeraciรณn.

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